單細胞測序樣本制備儀,基于Drop-seq技術(shù)*,完成高通量的單細胞mRNA 3’端測序。
氣候變化驅(qū)動的珊瑚疾病爆發(fā)導致珊瑚種群普遍減少。早期關(guān)于珊瑚基因組學的研究表明,珊瑚具有復雜的先天免疫系統(tǒng),全轉(zhuǎn)錄組基因表達研究揭示了珊瑚免疫系統(tǒng)對壓力和疾病的反應機制。
本研究擴展了可用于研究珊瑚分子生理學的生物信息學數(shù)據(jù),通過匯編和注釋加勒比珊瑚礁珊瑚Orbicella faveolata的參考轉(zhuǎn)錄組。由圣路易斯華盛頓大學的研究人員領(lǐng)導的一個小組 在2010年波多黎各的溫水熱異常,珊瑚褪色事件和加勒比黃帶病爆發(fā)期間收集樣本。
(A)無癥狀。
(B)加勒比黃帶病。
(C)部分漂白的菌落。
(D)完全漂白的菌落。
(E)加勒比黃帶病和漂白。
E. Weil的照片。
Illumina GAIIx平臺上的RNA的多重測序和Trinity的從頭轉(zhuǎn)錄組裝配分別產(chǎn)生70,745,177個原始短序列讀數(shù)和32,463個O. faveolata轉(zhuǎn)錄物。參考轉(zhuǎn)錄組用基因本體注釋,映射到KEGG途徑,并產(chǎn)生預測的20,488個序列的蛋白質(zhì)組。研究了跨越Phyla調(diào)節(jié)先天免疫所必需的蛋白質(zhì)家族和信號通路。該結(jié)果用于開發(fā)進化上保守的Wnt,Notch,Rig樣受體,Nod樣受體和Dicer信號傳導的模型。
來自N.vectensis(Nvec),O。faveolata(Ofav),A.pallida(Apall),A。digitifera(Adig)和A.millepora的預測蛋白質(zhì)序列用于具有100個引導的最大似然系統(tǒng)發(fā)育估計。
O. faveolata是一種珊瑚物種,已在氣候驅(qū)動的壓力和疾病下廣泛研究,目前的研究提供了推定調(diào)節(jié)其免疫系統(tǒng)的基因的新數(shù)據(jù)。
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